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烟草抗PVYN突变株SN01的SRAP-PCR反应体系的建立与优化
烟草 抗PVYN突变株 SRAP-PCR 体系优化
2015/8/31
采用正交试验对烟草抗PVYN突变株SN01幼嫩叶片的SRAP-PCR反应体系中5个主要因素(dNTPs、Mg2+、Taq DNA聚合酶、引物和DNA)进行了优化以建立合适的SRAP反应体系。结果表明,在20 μL的反应体系中,各因素的最佳加入量分别是:dNTPs(2.5 mmol/L)3.2 μL、Mg2+(25 mmol/L)1.6 μL、Taq DNA聚合酶(2.5 U/μL)0.16 μL、...
甘蔗健康种苗宿根矮化病的荧光定量PCR检测
甘蔗健康种苗宿根 矮化病 荧光定量 PCR检测
2011/9/7
通过对甘蔗健康种苗宿根矮化病的荧光定量PCR检测技术的研究,建立和完善检测甘蔗健康种苗体内甘蔗宿根矮化病病菌的实时PCR技术体系。选择经蔗汁检测宿根矮化病呈阳性的6株‘新台糖22号’甘蔗,经甘蔗健康种苗生产程序,获得健康种苗组培苗,利用实时荧光PCR技术检测甘蔗宿根矮化病病原菌基因在组培苗样本中的表达水平。实时荧光定量PCR检测结果为:10个不同处理的组培苗样本的PCR产物电泳检测未出现目的条带,...
转基因植物产品亲和诱捕-PCR-ELISA检测方法的建立
亲和诱捕 PCR-ELISA检测方法 转基因植物
2008/6/24
本研究采用亲和诱捕-PCR-ELISA方法,建立了亲和诱捕-PCR—ELISA方法,通过试验得到了固定诱捕DNA分子的最佳反应温度、时间、诱捕分子浓度、杂交温度、探针浓度等参数以及诱捕目的片段的最佳温度、时间等参数,制定了标准实验步骤。克隆了35S启动子和Nos终止子的PCR产物并测序,同已发表的35S启动子和Nos终止子的序列进行比较,同源性为98%,可用作亲和诱捕PCR-ELISA试剂盒的阳性...