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番茄环斑病毒和烟草环斑病毒是我国进境检疫性有害生物，本研究建立了单个和双重胶体金层析快速检测方法，在15min即可获得对双标记PCR产物的检测结果。单个胶体金层析是在一张层析膜上点上荧光素(或地高辛)的单克隆抗体作为T检测点，经生物素－荧光素（或生物素－地高辛）双标记的RT-PCR扩增产物可在T点上被检测到。双重胶体金层析是在一张层析膜上分别点上荧光素和地高辛的单克隆抗体作为T1和T2检测点，经生...
地黄实时定量PCR内参基因的筛选
地黄实 定量PCR 内参基因 筛选
2011/8/31
本文通过RT-qPCR分析了地黄中7个传统内参基因18S、EF-1?、ACT11、UBQ10、UBQ5、TUB5、GAPDH和4个新报道的内参基因PP2A、RPⅡ、HSP90、TIP41的mRNA表达差异情况，分别利用Ct值比较，GeNorm、NormFiner和BestKeeper软件分析它们在两个发育时期、八种不同组织器官中表达稳定性。结果表明：在地黄花器官中（花瓣、花托、雄蕊、雌蕊、子房），...
无核葡萄SRAP-PCR反应体系的建立和优化
无核葡萄 SRAP-PCR反应体系 建立 优化
2011/8/31
以大粒无核葡萄‘皇家秋天’的基因组DNA为模板，对无核葡萄SRAP-PCR反应体系的主要成分及反应退火温度进行优化。获得的最优SRAP-PCR反应程序为94℃预变性5 min，94℃变性1 min，38℃复性1 min，72℃延伸1 min，5个循环；94℃变性1 min，56℃复性1 min，72℃延伸1 min，35个循环；72℃终延伸10 min。25 μL体系中，模板DNA 40 ng，M...
Development of the Multiplex PCR Detection Kit for Salmonella spp., Listeria monocytogenes, and Escherichia coli O157:H7
foodborne pathogens rapid detection rapid screening
2011/2/24
This review describes the development of the multiplex PCR detection kit for Salmonella spp., Listeria monocytogenes, and Escherichia coli O157:H7 in food samples. To develop a detection assay, our re...