搜索结果: 1-15 共查到“园艺学 RT-PCR”相关记录16条 . 查询时间(0.094 秒)
为了明确引起杏衰退萎黄病的病毒种类，利用小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）高通量测序技术，结合生物信息寻找杏衰退萎黄样品中的病毒序列，发现存在亚洲李属病毒1（Asian prunus virus 1，APV1）和亚洲李属病毒3（Asian prunus virus 3，APV3）。为了验证该结果，采用RT-PCR对10个待测杏样品进行APV1、APV2和APV3...
根据文献报道和GenBank 已登录序列设计引物建立了马铃薯Y 病毒（potato virus Y，PVY）实时荧光定量RT-PCR检测技术体系。该技术标准曲线循环阈值与模板浓度呈现良好的线性关系，相关系数R2 为0.991 2，可特异性检测PVY，灵敏度达常规RT-PCR 的1 000 倍，重复性好。利用建立的检测方法对山东省、青海省、贵州省、黑龙江省和河北省5 个地区马铃薯植株中的PVY 进行...
为了明确近期新西兰报道的侵染猕猴桃的新病毒——猕猴桃病毒1（Actinidia virus 1，AcV-1）在四川地区猕猴桃上的发生情况及其分子特性，采用RT-PCR对来自四川6个地区疑似感染病毒的90份猕猴桃主栽品种‘红阳’和‘金果’的叶片样品进行检测。结果表明，22份样品为AcV-1阳性，检出率为24.4%。将获得的5个AcV-1分离物和已报道的新西兰分离物K75的外壳蛋白（coat prot...
葡萄蚕豆萎蔫病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法及应用
葡萄 葡萄蚕豆萎蔫病毒 实时荧光定量RT-PCR RT-PCR
2020/2/10
建立了葡萄蚕豆萎蔫病毒（Grapevine fabavirus，GFabV）的实时荧光定量RT-PCR（RT-qPCR）检测技术。该技术标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系（扩增效率103.8%，相关系数0.998），灵敏度是常规RT-PCR的1 000倍，并具有特异性。采用RT-qPCR和常规RT-PCR方法对葡萄不同发育时期及不同部位的316个样品进行检测，结果表明RT-qPCR方法对G...
为了明确引起茄子斑驳紫花病的病毒种类，利用小干扰RNA（siRNA）高通量测序技术，结合生物信息学方法寻找茄子样本中的病毒序列，发现存在烟草轻型绿花叶病毒（Tobacco mild green mosaic virus，TMGMV）和番茄斑驳花叶病毒（Tomato mottle mosaic virus，ToMMV）。为了验证该结果，对待测样品中TMGMV和ToMMV的外壳蛋白（coat prot...
葡萄病毒A实时荧光定量RT-PCR检测技术的建立及应用
葡萄 葡萄病毒A 检测 实时荧光定量RT-PCR 常规RT-PCR
2018/12/24
根据文献报道和GenBank已登录序列设计引物建立了葡萄病毒A（Grapevine virus A，GVA）SYBR GreenⅠ染料法实时荧光定量RT-PCR检测技术体系。该技术标准曲线循环阈值与模板浓度呈现良好线性关系，扩增效率为99.2%，决定系数为0.999，可特异性检测GVA，灵敏度高（达常规RT-PCR的100倍），重复性好。对不同季节、不同品种以及不同部位葡萄样品（嫩叶、嫩叶柄、老叶...
根据辣椒疫霉菌（Phytophthora capsici Leonian）与致病疫霉菌（Phytophthora infestans）及其他8种常见土传病害病原菌Actin基因序列差异，设计并筛选出辣椒疫霉菌的特异性引物YM2F/YM2R，建立辣椒疫霉菌的实时荧光定量PCR检测体系，并利用该体系定量检测人工模拟带菌样品及田间发病土壤样品中的辣椒疫霉菌。试验结果表明，利用该引物建立的实时荧光定量PC...
选用柑橘黄化脉明病毒（Citrus yellow vein clearing virus，CYVCV）和柑橘衰退病毒（Citrus
tristeza virus，CTV）两种病毒外壳蛋白保守序列及内参基因Ubiquitin 的特异性引物，优化影响二重RT-PCR
反应的Mg2+浓度、dNTPs 浓度、引物浓度和退火温度，建立了针对两种病毒的一步法二重RT-PCR 检测
体系。二重RT-PCR...
柑橘黄化脉明病毒基因组的长链RT-PCR扩增、克隆及序列分析
柑橘黄化脉明病毒 RACE 全长cDNA 长链RT-PCR
2018/5/21
为了建立柑橘黄化脉明病毒（Citrus yellow vein clearing virus，CYVCV）基因组长链RT-PCR扩增体系，构建其全长cDNA克隆，为深入了解CYVCV分子特性及其致病机理奠定基础。根据GenBank中CYVCV基因组序列和5′ RACE扩增结果设计引物。以感染CYVCV的代代酸橙（Citrus aurantium ‘Daidai’）植株总RNA为模板进行长链RT-P...
平菇细菌性褐斑病病原菌RT-PCR检测方法的建立及其应用
平菇 托拉斯假单胞杆菌 实时荧光定量PCR
2013/9/9
平菇细菌性褐斑病是一种严重危害平菇生产的病害，早期监测和防治是关键。采用平菇细菌性褐斑病病原菌托拉斯假单胞杆菌（Pseudomonas tolaasii）毒素基因的特异性引物（Pt-1A）/（Pt-1D1），通过扩增条件优化，建立了该菌的实时荧光定量PCR（Real-time fluorescence quantitative Polymerase Chain Reaction）检测及富集方法，并...
葡萄4种病毒多重RT-PCR检测体系的建立
中国农业科学院果树研究所国家落叶果树脱毒中心
2012/10/17
以复合感染4种病毒的‘红地球’（Red Globe）葡萄样品为试材，对影响多重PCR的dNTPS浓度、Taq酶浓度、引物浓度、退火温度及模板量进行了调整和优化，建立了能同时检测葡萄卷叶伴随病毒3（Grapevine leafroll-associated virus-3，GLRaV-3）、沙地葡萄茎痘相关病毒（Grapevine rupestris stem pitting associated ...
番茄环斑病毒和烟草环斑病毒是我国进境检疫性有害生物，本研究建立了单个和双重胶体金层析快速检测方法，在15min即可获得对双标记PCR产物的检测结果。单个胶体金层析是在一张层析膜上点上荧光素(或地高辛)的单克隆抗体作为T检测点，经生物素－荧光素（或生物素－地高辛）双标记的RT-PCR扩增产物可在T点上被检测到。双重胶体金层析是在一张层析膜上分别点上荧光素和地高辛的单克隆抗体作为T1和T2检测点，经生...
笔者以带GLRaV-3 病毒的红地球为试材，研究了6-BA、NAA、IBA、KT不同配组及茎尖大小对茎
尖培养的影响，并利用RT-PCR技术对部分红地球组培苗进行了GLRaV-3 病毒检测。研究结果表明：红
地球葡萄茎尖培养脱毒最佳茎尖初始培养基为：1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+KT 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L，最
佳茎尖分化培养基为：B5+KT 1.0 mg/L+...
喇叭水仙中百合斑驳病毒的RT-PCR检测及序列分析
喇叭水仙 百合斑驳病毒 RT-PCR
2009/8/5
根据基因库中已发表的百合斑驳病毒（Lily mottle virus, LMoV）外壳蛋白基因序列设计引物，通过RT-PCR方法从喇叭水仙Narcissus pseudonarcissus‘Pink-charm’ 样品中扩增出1条大小与试验设计相符的553 bp的特异性LMoV RT-PCR带。扩增产物序列分析表明：与GenBank中百合斑驳病毒百合分离物核苷酸相似性在90%以上。将该序列翻译为外...