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2023年4月,中国科学院武汉病毒研究所/病毒学国家重点实验室周溪/邱洋团队在国际学术期刊Cell Reports发表了题为“Alphavirus infection triggers antiviral RNAi immunity in mammals”的研究论文。该研究首次发现野生型甲病毒感染哺乳动物体细胞及成年小鼠可以有效激发RNA干扰(RNAi)介导的抗病毒免疫,拓展了我们对哺乳动物中RN...
本研究针对东北梅花鹿S100A4 基因筛选出若干条RNAi 靶位点,并利用NCBI 中的BLAST 工具去除脱靶情况,最终得到2 条高分靶位点。然后在T4 连接酶的作用下,将其与载体质粒pLVTHM 的酶切产物进行连接,并通过PCR 鉴定及测序筛选出阳性质粒。pLVTHM 阳性重组质粒与pMD2. G 及pCMV-dr8.91 共转染到293 T 细胞中。在倒置荧光显微镜下观察转染效果并进行收获病...
RNAi及其在哺乳动物中的应用
应用 哺乳动物 RNAi
2008/5/30
RNA干扰(RNAi)是由特定双链RNA(dsRNA)引发的转录后基因沉默,广泛存在于真菌、植物和动物中,它是近年来迅速发展起来的高效、特异、易操作的基因阻断技术,在功能基因组的研究中有着广阔的应用前景。研究表明,断裂dsRNA产生的小干扰RNA(siRNA)可抑制哺乳动物基因表达。从哺乳动物整体水平应用研究的角度,对RNAi的分子机制、生物学功能和特点,siRNA导入体内的方法以及应用等方面的研...
RNA干涉(RNAi)技术应用于哺乳动物细胞的研究策略
RNA干扰 siRNA 基因功能分析 哺乳动物细胞
2008/2/1
摘要RNAi作为新近发展起来的基因功能分析技术,近年来在哺乳动物细胞中的研究已取得了长足进展,且有着广泛的应用前景。对RNAi作用机制及RNAi实验操作技术的探讨是目前研究的热点。研究表明,哺乳动物细胞中的RNAi作用模式与植物有所不同。文章对RNAi作用机制、哺乳动物细胞RNAi实验的一般策略(包括靶siRNA序列选择、siRNA获取方法、siRNA转染、RNAi效果检测等)以及最新研究进展进行...