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热休克因子1对内毒素所致G-CSF基因表达的影响
热休克因子1 RAW264.7巨噬细胞 内毒素 粒细胞集落刺激因子 热休克反应
2007/12/24
摘要 为探讨热休克因子 1(heatshockfactor 1,HSF1)活化和过表达对内毒素 (endotoxin ,ET)所致粒细胞集落刺激因子 (granulocyte colonystimulatingfactor,G CSF)基因表达的影响 ,采用大肠杆菌内毒素即脂多糖 (lipopolysaccharide ,LPS)处理RAW2 6 4 7巨噬细胞 ,并通过热休克预处理诱导HSF1活...
摘要 为开展肿瘤的复合基因治疗 ,构建以串联方式携带人野生型p53、GM CSF和B7 1基因的重组腺病毒穿梭质粒pBB 1 0 2 .将pBB 1 0 2与腺病毒包装质粒GT40 50共转染 2 93细胞 ,通过细胞内同源重组获得重组腺病毒BB 1 0 2 .在 2 93细胞中扩增病毒 ,并通过氯化铯密度梯度超速离心纯化病毒 ,获得高滴度和高纯度的病毒 .分别经免疫组织化学分析、ELISA和流式...
摘要 从LPS刺激的正常中国人外周血单核细胞中提取mRNA,经反转录(RT)-PCR扩增出不含信号肽和成熟型N端5氨基酸(V5-hG-CSF)的cDNA片段,酶切后组入大肠杆菌表达载体pJLA602中。序列测定表明,克隆片段与国外报道的高活性hG-CSF cDNA序列一致。重组子经诱导表达、小鼠骨髓细胞体外CFU-G测试表明,表达产物具明显的粒细胞集落刺激活性。
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摘要 基因工程重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)主要用于癌症患者化疗后的粒细胞减少症.在正确克隆人G-CSFcDNA的基础上,重点对G-CSFcDNA的5′端进行了较为彻底的修饰,修饰后的基因插入pBV220载体组建成功pBV220/G-CSF/2-174高效表达载体.表达后SDS-PAGE分析其表达最高达50%以上.根据G-CSF表达形成包涵体这一特性,建立了一条简便、稳定,适用于大规模...
人G-CSF转基因鼠的稳定遗传与表达
人G-CSF 遗传 转基因鼠
2007/12/18
摘要 利用人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)基因组基因作为目的片段,将其受控于2.6kb的小鼠乳清酸蛋白(WAP)基因的调控区下,通过显微注射法获得了两只整合有人G-CSF转基因小鼠,通过繁殖建立了稳定的转基因系.一些表型参数测定表明转基因鼠与正常鼠无明显差别.通过RT-PCR及Southernblot检测,在乳腺表达出人G-CSF,为乳腺表达外源蛋白质及今后大动物研究奠定了基础.
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人粒细胞集落刺激因子(hG-CSF)cDNA3′-UTR对其表达的影响
hG-CSFcDNA 3′-UTR 表达调控
2007/12/18
摘要 利用人粒细胞集落刺激因子(hG-CSF)cDNA3′端非翻译区(3′-UTR)中存在的DraⅠ酶切位点,通过部分酶切与完全酶切,删除3′-UTR不同长度,构建了四种hG-CSFcDNA瞬时重组表达质粒。转染COS-7细胞后,生物活性测定结果提示,hG-CSFcDNA3′-UTR对其表达起负调控作用,其关键性序列位于紧接终止密码子TGA下游的65bp范围内,3′-UTR对hG-CSFcDNA表...
摘要 将人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和人血清白蛋白第三功能区(HAS-D3)的基因串联后,在E.coli中获高效表达,表达量占菌体蛋白的32.6%.利用TF-1体外细胞活性测定表明,GM-HSA的活性单位为1.04×10~6U/mg,虽然其比活性低于GM-CSF,但比后者具有更高的体外热稳定性和储藏稳定性.
期刊信息
篇名
Enhancement of J6-1 human leukemic cell proliferation by membrane-bound M-SCF througf a cell-cell contact mechanism ll.Role of an M-CSF receptor-like membrane protein
语种
英文
撰写或编译
作者
Wu KF,Rao ...