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对弓形虫GT1株、ME49株和人的β微管蛋白的氨基酸序列进行生物信息学分析。根据生物信息学分析结果,人工合成弓形虫β微管蛋白氨基酸序列C端小分子抗原肽。用合成的抗原肽免疫日本大耳兔,每2周免疫1次,0.5 mg/(只·次),共5次。末次免疫后2周,收集兔血清,ELISA检测血清中特异性抗体效价,蛋白质印迹(Western blotting)检测该多克隆抗体与弓形虫RH株、ME49株和PRU株速殖子...
对2008-2013年孝感市27例输入性疟疾病例进行流行病学分析,恶性疟21例(77.8%),间日疟6例(22.2%)。青壮年男性25例,占97.3%。2010-2013年报告病例呈上升趋势,无明显季节性。7个县市区均有报告病例,孝南区最多,为11例(40.7%),感染来源地以非洲为主,共23例。
采用PCR方法扩增武汉市2010-2013年经镜检和巢式PCR确诊的101份国外输入性恶性疟病例血样的Pf60.1基因,研究Pf60.1基因多态性。PCR结果显示,共92份血样扩增出3类基因片段,其中52份扩增出313 bp片段,占56.5%;34份扩增出340 bp片段,占37.0%;6份扩增出313 bp和340 bp混合型片段,占6.5%。83份自非洲地区输入病例血样中,46份扩增出313 ...
于2013年5~11月从嫩江流域齐齐哈尔段的绰尔河、雅鲁河、乌裕尔河、阿伦河和音河采集野生淡水鱼,直接压片法检查华支睾吸虫囊蚴感染情况,人工消化法获取囊蚴。40只雌性昆明小鼠感染华支睾吸虫囊蚴(30~40个/鼠),36 d后解剖小鼠,收集肝胆管内的虫体,醋酸洋红染色后,镜下观察。共采集到9种1 175尾野生淡水鱼,华支睾吸虫囊蚴总感染率为51.2%(602/1 175)。除鲶鱼外,其他鱼种均有不同...
吸虫在人体中的各阶段均可致病,其在人体内释放的致病因子,可诱发宿主免疫应答,引起一系列的免疫病理变化,是造成宿主损害而导致血吸虫病的重要原因。巨噬细胞作为机体固有免疫的重要组成细胞,与血吸虫病的发生发展密切相关,本文从巨噬细胞的激活和分化,它在血吸虫病引起的免疫病理反应中的作用,及其在血吸虫免疫逃避中的作用3个方面进行了归纳和总结。
研究旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白对人小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡的影响。 方法 旋毛虫肌幼虫培养24 h,收集培养液,取上清,即为旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白。将人小细胞肺癌NCI-H446细胞(编号A054)随机分为3组,实验组(A组)和细胞凋亡组(B组)的NCI-H446细胞(5×106/ml)分别与旋毛虫排泄分泌蛋白(终浓度为0.3 mg/ml)和顺铂(6.4 μg/ml)共培养24 h,...
研究大头金蝇(Chrysomya megacephala)卵不同发育时间的形态变化和基因表达差异规律。 方法 从大头金蝇成虫产完卵后,取出卵块,记时为0 h,每隔2 h取卵10枚,直至有幼虫孵出,分别用体视显微镜和扫描电镜观察其不同发育时间的形态学变化。提取0、2、4、6和8 h等5个发育时间点的蝇卵RNA,应用RT-PCR比较循环阈值(threshold cycle,CT值)法测定bicoid、...
了解大理地区肝片形吸虫(Fasciola hepatica)的中间宿主种类和虫体发育过程及特点。 方法 2012年7月~2013年7月,在大理地区收集牛源肝片形吸虫虫卵,置28 ℃水浴箱中孵化;并在大理农村无粪便污染的农田、沟渠内,捕捉尖膀胱螺(Physa acuta)、椭圆萝卜螺(Radix swinhoei)和小土蜗(Galba pervia),实验前证实无任何吸虫感染。毛蚴分别感染尖膀胱螺、...
探讨粉尘螨Ⅲ类重组变应原(rDer f 3)对过敏性哮喘小鼠的免疫治疗效果。 方法 随机将40只BALB/c小鼠均分为4组,哮喘组、免疫治疗组、卵清蛋白(OVA)组和PBS组,分别在第0、第7和第14天哮喘组和免疫治疗组每鼠经腹腔注射100 μl致敏液(含rDer f 3 10 μg);卵清蛋白组每鼠经腹腔注射100 μl致敏液(含OVA 10 μg);PBS组则以PBS代替致敏液。第21天起,哮...
构建森林革蜱(Dermacentor silvarum)半饱血雄蜱抑制消减杂交cDNA文库,分析差异基因。 方法 以森林革蜱半饱血雄蜱为实验组(tester),未吸血雄蜱为对照组(driver),分别提取总RNA,SMARTER PCR合成双链cDNA,Rsa Ⅰ酶切后连接接头并进行抑制消减杂交。巢式PCR扩增杂交产物,经柱纯化后连接至PMD?鄄18T中,转化大肠埃希菌DH5α感受态细胞,进行蓝白...
该文通过对江陵县2009—2013年血吸虫病防治管理模式的回顾与总结,阐述了江陵县近5年以政策保障为支撑,县乡两级政府落实目标责任、完善监管机制。防治工作以质量控制为根本,采取样本集中检测、开展定期与不定期工作督导,真实掌握全县疫情。江陵县创造性地开展血吸虫病防治工作,提出“二个围绕,三个同步”工作原则,充分发挥网络平台作用,提高群众血防意识。该文将江陵县达到传播控制目标后,对今后血吸虫病防治迈向...
通过全基因合成猪带绦虫TSOL18基因,将该基因定向克隆至大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT中,构建重组质粒pGEX-TSOL18,电穿孔法将该质粒导入长双歧杆菌(Bifidobacterium longum),构建猪带绦虫双歧杆菌表达系统pGEX-TSOL18/B. longum,并通过酶切、PCR和测序鉴定。全基因合成了393 bp的TSOL18基因片段。酶切、PCR和测序鉴定结...
基于核糖体DNA ITS区和COX1基因,PCR鉴别鱼体内华支睾吸虫囊蚴。 方法 于2013年5月底采集广西横县某水库的麦穗鱼,用消化法从鱼肉组织中分离单个华支睾吸虫囊蚴及其他吸虫囊蚴;PCR检测华支睾吸虫核糖体DNA ITS区和COX1基因,并分析检测的灵敏性和特异性。 结果 分离到不同发育阶段的华支睾吸虫囊蚴并经PCR检测证实。用针对核糖体DNA ITS区和COX1基因的PCR均能检测...
利用定点突变技术鉴定弓形虫微线体蛋白6(MIC6)与醛缩酶的作用位点。 方法 根据GenBank中的弓形虫RH株MIC6基因序列(登录号为AF110270)及C端序列设计特异性引物,将MIC6 蛋白羧基端(MIC6C)348位色氨酸(W348)的密码子碱基突变为缬氨酸(V)的碱基,PCR扩增MIC6C W/V突变体基因片段,克隆至原核表达质粒pGEX-4T-1,转化至大肠埃希菌BL21(DE3...
克隆、表达白纹伊蚊唾液腺重组aegyptin相似蛋白alALP编码基因并分析其抗原性。 方法 运用生物信息学方法分析alALP与aegyptin氨基酸序列(GenBank登录号为ABF18122.1)的同源性、二级结构和抗原肽段。提取白纹伊蚊唾液腺总RNA,根据alALP的基因编码序列(GenBank登录号为AY826121)设计引物,RT-PCR扩增目的基因,亚克隆至pGEX-6P-1质粒,...

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