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构建p27真核表达载体并导入胃癌SGC-7901细胞获得稳定表达p27的稳定细胞株,以研究p27在胃癌SGC-7901细胞顺铂耐药中所发挥的功能。方法:以乳腺文库为模板,PCR扩增出p27编码区,并将其连接到pCDNA 3.0-Flag载体上,转染293T细胞后分别用定量PCR和Western blot检测其表达情况,并通过Western blot检测SGC-7901细胞过表达Flag-p27稳定...
研究肾母细胞瘤过表达基因(NOV/CCN3)在肾透明细胞癌(ccRCC)中与增殖细胞核抗原Ki-67、血管内皮生长因子(VEGF)、细胞周期依赖性激酶抑制因子p27、环氧合酶2(COX-2)的相关性。方法 用过表达NOV质粒pEGFP-C1-NOV转染人肾透明细胞癌细胞株786-O, 实时定量PCR(RT-PCR)技术测定转染了过表达NOV质粒的细胞(实验组)、转染了空载体的细胞(空载组)及未...
PI3K信号通路对胃癌细胞P27磷酸化蛋白分布表达的影响
PI3K信号通路 胃癌 P27蛋白 磷酸化P27蛋白
2014/5/27
研究PI3K信号通路对胃癌BGC-823细胞中P27与磷酸化P27(p-P27)蛋白表达分布的影响。方法:LY294002处理BGC-823细胞,流式细胞术测定处理前后两组细胞周期分布。Western blotting测定两组细胞总蛋白、胞浆蛋白、核蛋白中P27与p-P27(Thr187、Thr157及Ser10)蛋白含量及分布特点。结果:处理后G1期细胞数明显增加(83.9% vs. 67.6%...
观察p27基因对人宫颈癌细胞HeLa增殖及凋亡的影响。方法 将已构建成功的腺病毒载体Ad-p27转染至宫颈癌细胞系HeLa细胞,Western blotting法检测病毒转染后p27蛋白在不同时间点表达;噻唑兰(MTT)法检测其对肿瘤细胞增殖的影响;流式细胞术检测其对肿瘤细胞凋亡的影响。结果 HeLa细胞成功转染进Ad-p27;在各观察的时间点内,与对照组比较,同一时间点的细胞中p27蛋白水平均显...
种蛋中禽白血病病毒P27抗原检出率与鸡群禽白血病发病率的相关性研究
禽白血病病毒 P27抗原 ALV-A/B ALV-J
2013/12/2
本研究旨在观察种鸡群所产种蛋中禽白血病病毒P27抗原检出率与种鸡群发病状况及其下一代鸡群禽白血病发病率的相关性,为鸡群净化和禽白血病预警提供参考依据。对国内海兰褐蛋鸡等品系不同祖代及父母代共7个种鸡场所产种蛋的P27抗原进行了检测,对部分种鸡场的ALV-A/B和ALV-J抗体进行了检测和病毒的分离鉴定,对各种鸡群孵化后下一代鸡群的禽白血病发病状况和客户投诉情况进行了追踪调查。7个种鸡场所产种蛋中P...
研究胃癌BGC823细胞系中过表达P27蛋白时,P27及其磷酸化蛋白在细胞中的分布。方法:将外源性P27Kip1基因转染人胃癌细胞系BGC823,应用流式细胞分析术检测转染组和对照组的细胞周期和细胞凋亡,采用Western blot和免疫荧光方法,检测P27蛋白和磷酸化P27蛋白(p-P27)在二组细胞中的表达和分布。结果:转染组细胞G1期细胞数较对照组明显增加(62.783% vs. 41.93...
目的 研究p53、p27和mdm2蛋白在胃肠道间质瘤(GIST)中的表达及其与GIST生物学行为的关系,为预测该肿瘤的侵袭潜能提供理论依据和可能的预测指标。方法 收集68例手术切除的GIST标本,应用免疫组织化学法检测肿瘤组织中p53、p27和mdm2蛋白的表达,并结合病理形态学及生物学行为评价进行统计学分析。结果 68例GIST中p53、p27和mdm2蛋白阳性表达率分别为75%、54.41%和...
细胞周期调控因子p27在骨肉瘤中的表达及其临床意义
骨肉瘤 基因表达调控 免疫组织化学 p27
2011/10/11
目的:探讨细胞周期负性调控因子p27在骨肉瘤组织中的表达及其临床意义。方法: 应用SP免疫组织化学方法检测46例骨肉瘤和l6例骨软骨瘤组织中p27的表达,并观察p27表达在骨肉瘤组织学分型、分化程度等临床指标之间的差异。结果: 46例骨肉瘤组织中p27的阳性表达率分别为43.5%,而在骨软骨瘤的阳性表达率为81.5%,与骨肉瘤组比较有统计学意义(P<0.01);骨肉瘤中,低分化组织、临床分期为Ⅱ...
探索榄香烯围手术期应用后对外周血淋巴细胞cyclinD1、p16、p27的调控及临床意义。方法 回顾性分析新入院确诊且准备手术同意围手术期输注榄香烯的进展期胃癌患者18例。用流式细胞仪检测榄香烯干预治疗者术前、后外周血淋巴细胞cyclinD1、p16、p27的表达。结果 榄香烯干预治疗者外周血淋巴细胞cyclinD1、p27的表达在术前、后存在差异性(P<0. 05),其中cyclinD1的表达术...
探讨细胞周期素D1(cyclin D1)、细胞周期素E(cyclin E)及p27在肾盂移行细胞癌中的表达及意义。方法 选择肾盂移行细胞癌手术切除标本63例,WHO(1998)病理分级:G112例、G240例、G311例;UICC(1997)TNM病理分期:Ta4例、T19例、T224例、T317例、T49例。11例因外伤切除正常肾盂组织作为正常对照组。应用免疫组化二步法检测组织中cyclin ...
抑癌基因P27在急性白血病中作用的研究进展
急性白血病 细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 DNA甲基化
2012/5/18
P27是近年发现的一种抑癌基因,是细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(cyclindependent kinase inhibitor,CDKIs)家族成员之一。作为细胞周期负调控因子,P27蛋白具有参与细胞周期调控、诱导凋亡、促进细胞分化等多种生物学功能。许多实体瘤存在着P27基因的缺失、突变和低表达,P27的表达水平与急性白血病的发生、发展、治疗、预后密切相关。P27可应用于急性白血病的靶...
评估本实验室自制包载雷帕霉素(RPM)的聚乳酸-聚乙醇酸共聚物(PLGA)纳米粒子(NPs)对离体培养的人脐动脉平滑肌细胞(HUASMC)细胞周期时相、p27蛋白表达和细胞增殖的影响。方法 按不同浓度RPM-PLGA NPs设定药物作用组,并设立RPM组、PLGA组和M231培养基及平滑肌细胞生长添加剂(M231-SMGs)组作为对照。采用细胞免疫组织化学染色比较不同处理组HUASMC p27蛋白...
人突变p27基因转染大肠癌细胞凋亡的实验研究
结直肠肿瘤 基因 p27mt 细胞凋亡
2009/10/27
目的:探讨人突变p27基因对大肠癌细胞凋亡的诱导作用。 方法: 构建重组腺病毒Ad-p27mt,转染大肠癌细胞SW480,用流式细胞仪、DNA片段分析法、TUNEL法观察Ad-p27mt对大肠癌细胞凋亡的诱导作用。 结果: 成功构建了Ad-p27mt,在感染复数≥50时,可达100%的转导效率。Ad-p27mt转染SW480 24 h后流式细胞仪检测在G1期前出现了亚二倍体凋亡峰,细胞DNA提取电...
胃癌及癌前病变中P27和Cyclin E蛋白的表达意义
胃癌 P27 Cyclin E 免疫组织化学
2009/8/14
目的: 探讨P27和Cyclin E蛋白在胃癌及癌前病变中的表达及其与胃癌病理参数之间的关系. 方法: 用免疫组化技术(SP法)对正常胃黏膜(normal gastric mucosa, NGM)、慢性浅表性胃炎(chronic superficial gastritis CSG)、慢性萎缩性胃炎(chronic atrophia gastritis, CAG)伴肠上皮化生、慢性萎缩性胃炎伴非典型...