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探讨HPV16E6 siRNA联合5-Aza-CdR(5-aza-2'-deoxycytidine,5-氮-2'-脱氧胞苷,又称地西他滨)对宫颈癌SiHa细胞中E-钙黏蛋白表达和基因甲基化的影响。方法:采用SiHa细胞构建的HPV16E6 沉默细胞株及5-Aza-CdR细胞株,检测细胞中E-cadherin mRNA和蛋白表达,以及E-cadherin甲基化状态。采用细胞黏附、Transwell体...
探讨siRNA干扰PTX3基因在子宫内膜癌组织中的表达及其对子宫内膜癌细胞增殖的影响。方法:实时荧光定量PCR法检测子宫内膜癌组织中PTX3基因的表达。MTT法检测人子宫内膜癌RL95-2细胞增殖能力。流式细胞术检测RL95-2细胞周期分布。Western blot检测RL95-2细胞PTX3、p-AKT和AKT蛋白表达水平。
采用siRNA技术沉默IFITM1基因表达,观察对卵巢癌CP70细胞侵袭及凋亡能力的影响及其可能的分子机制。方法:利用脂质体转染法将靶向IFITM1的小干扰RNA转染卵巢癌CP70细胞株;Western blot检测CP70细胞IFITM1蛋白的表达;Transwell侵袭小室、MTT、流式细胞仪检测转染细胞侵袭力、顺铂敏感性和凋亡的变化;Western blot观察转染后CP70细胞caspas...
本文通过慢病毒介导siRNA干扰卵巢癌SKOV3细胞中心体相关蛋白55(CEP55)表达,以观察其对细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移等生物学行为的影响。实验分为CEP55组(转染CEP55 siRNA慢病毒)、阴性对照组(转染不含CEP55 siRNA的慢病毒)和空白对照组(不处理)。结果显示:CEP55 siRNA慢病毒转染效率为(89.4±4.7)%,CEP55组CEP55的mRNA和蛋白表达显著降...
探讨DKK1 siRNA干扰的DKK1低表达对子宫内膜癌Ishikawa细胞侵袭、迁移能力的影响及作用机制。方法 瞬时转染DKK1 siRNA至培养的子宫内膜癌Ishikawa细胞;应用实时定量PCR和蛋白免疫印迹方法分别检测转染前后细胞中DKK1的mRNA和蛋白表达;应用Transwell实验检测癌细胞侵袭、迁移能力。应用荧光显微镜观察转染前后Wnt/β-catenin信号通路中活性β-cate...
构建C型凝集素受体(C-type lectin receptor,CLRs)过表达/siRNA慢病毒载体,并将其瞬时转染树突状细胞(dendritic cell,DC)。方法 免疫磁珠分离、培养及鉴定胎盘和蜕膜来源的DC;构建CLRs过表达/siRNA慢病毒载体并转染DC;抽提转染CLRs过表达/siRNA慢病毒后的DC的总RNA;RT-PCR检测DC转染慢病毒前后CLRs基因mRNA表达量。结果...
探讨靶向人乳头瘤病毒16早期蛋白5(HPV16-E5)的siRNA对TRAIL蛋白诱导子宫颈癌Caski细胞株凋亡的调节作用。方法 HPV16-E5 特异性 siRNA转染48h后,RT-PCR检测HPV16-E5 mRNA的表达;流式细胞术及caspase-8活性检测试剂盒分别检测空白对照组、siRNA-E5单独作用组、TRAIL单独作用组、siRNA-E5+TRAIL作用组、无关序列RNA...
目的: 观察HPV16 E6 siRNA表达载体对宫颈癌Caski细胞凋亡和增殖的影响。方法: 利用脂质体将HPV16 E6特异性siRNA表达载体转染Caski细胞,通过荧光定量RTPCR检测E6 mRNA的变化,流式细胞仪检测E6蛋白和细胞凋亡率的变化,MTT法和细胞克隆法检测细胞增殖的变化。结果: HPV16 E6 siRNA表达载体可明显抑制Caski细胞E6 mRNA和E6蛋白的表达,...
探讨间皮素(mesothelin,MSLN)siRNA慢病毒对人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤的治疗作用。 方法: 利用人卵巢癌SKOV3细胞建立卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤模型。实验分为3组:治疗组、阴性对照组和空白对照组。治疗组应用携间皮素siRNA慢病毒液(LV-MSLN-shRNA)对裸鼠模型进行治疗,阴性对照组采用空载体(LV-MSLN-neg)慢病毒液进行治疗,空白对照组注射PBS治疗。从裸鼠生长一般情...

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