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非洲锥虫病又称非洲睡眠病或嗜睡性脑炎，是一种由锥虫经舌蝇叮咬而传播的人兽共患寄生虫病，在非洲撒哈拉南部肆虐，其中有些流行区患病率高达八成。目前，通过阻断这些锥虫内源性甾醇合成途径来研发新型抗感染药物，是国际上的研究热点。
恶性疟原虫乳酸脱氢酶单克隆抗体的制备及其鉴定
恶性疟原虫 乳酸脱氢酶 单克隆抗体
2009/4/7
[目的 ]制备抗恶性疟原虫乳酸脱氢酶 (LDHp)单克隆抗体 (McAb) ,并对其特异性进行鉴定。[方法 ]用纯化的LDHp重组抗原免疫BALB/c小鼠 ,采用杂交瘤技术制备McAb ,筛选分泌高滴度McAb的杂交瘤细胞株 ,测定其免疫球蛋白亚类及其效价 ,ELISA、Westernblot试验分析其特异性。 [结果 ]筛选出 2A5和1H10两株能稳定分泌抗LDHpMcAb的杂交瘤细胞株 ,两...
恶性疟原虫二氢叶酸还原酶基因的突变
恶性疟原虫 二氢叶酸还原酶(dhfr)基因 基因突变
2009/2/25
目的 探测云南恶性疟原虫二氢叶酸还原酶基因 (dhfr)与乙胺嘧啶和双氯胍抗性有关的基因位点突变的情况。方法 应用特异性套式PCR和限制性酶切片段长度分析 (RFPS)检测采自现场的干滤纸血样。结果 检测到恶性疟原虫dhfr基因内 16 ,5 1,10 8和 16 4位氨基酸有不同程度的突变 ,以Asn 10 8和Ile 5 1为甚 ,出现频率分别为 94.1%和 90 .1%。野生型 (3D7型...
恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶在大肠埃希菌中的可溶性表达、纯化和鉴定
恶性疟原虫 谷氨酸脱氢酶 大肠埃希菌 可溶性表达
2009/2/25
目的 在大肠埃希菌 (E .coli)中尝试非融合蛋白技术可溶性表达恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶 (GDH) ,以获得具有相对完整空间表位的重组非融合GDH。 方法 将恶性疟原虫GDH基因克隆到pET-23 (a)表达载体中 ,转化E .coli BL21菌株 ,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达 ,菌体反复冻融后 ,通过十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE)分析表达产物的存在形式 ...
目的 克隆恶性疟原虫海南株 (FCC1/HN)株糖酵解醛缩酶 (ALD)编码区基因。 方法 利用已知ALD基因序列设计一对特异性引物,从基因组DNA中用PCR扩增ALD基因,将其克隆入pQE30载体,阳性克隆经酶切鉴定后测序,在此基础上将重组质粒转化大肠埃希菌M15进行表达。 结果 PCR扩增后获得特异性扩增片段,测序结果显示我国的恶性疟原虫FCC1/HN株与恶性疟原虫3D7株ALD基因序列完全相...
恶性疟原虫FCC1/HN株3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的序列测定
恶性疟原虫 FCC1/HN株 3-磷酸甘油醛脱氢酶 基因
2009/2/25
恶性疟原虫FCC1/HN株3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的序列测定。
恶性疟原虫乳酸脱氢酶的表达及免疫活性鉴定
恶性疟原虫 乳酸脱氢酶 表达 免疫活性
2009/2/25
目的 在大肠杆菌中表达恶性疟原虫乳酸脱氢酶 (LDHp)与谷胱甘肽S 转移酶 (GST)融合蛋白 ,测定重组蛋白的免疫活性。方法 采用PCR方法特异性扩增恶性疟原虫 (海南株 )乳酸脱氢酶基因 ,经双酶切后克隆入 pGEX 4T 1表达载体中 ,重组蛋白纯化后免疫小鼠制备特异性血清 ,并用琼脂双向扩散法检测效价 ,ELISA、Western bloting检测重组抗原的免疫活性。结果 得到了重组表...
恶性疟原虫乳酸脱氢酶特异性单克隆抗体的制备
恶性疟原虫 乳酸脱氢酶 单克隆抗体
2009/2/25
目的制备恶性疟原虫乳酸脱氢酶特异性单克隆抗体。方法克隆、表达恶性疟原虫乳酸脱氢酶基因,并以表达的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,对所制备的单克隆抗体确定其亚类和效价,蛋白质印迹法(Western blotting)分析其特异性。结果成功克隆并表达了恶性疟原虫乳酸脱氢酶基因,以重组恶性疟原虫乳酸脱氢酶蛋白作为免疫源制备单克隆抗体,共筛选了15株能高效分泌效价在1∶6 40...
瑞香素对恶性疟原虫细胞色素C氧化酶及核糖核酸还原酶活性的影响
瑞香素 恶性疟原虫 细胞色素C氧化酶 核糖核酸还原酶
2009/2/20
目的 体外测定瑞香素对恶性疟原虫细胞色素C氧化酶（COX）及核糖核酸还原酶（RNR）活性的影响。方法 Trager & Jensen法体外培养恶性疟原虫FCC1/HN分离株，超声波破碎恶性疟原虫提取总蛋白，用紫外分光光度计检测瑞香素与瑞香素-Fe复合物在不同作用时间和不同作用浓度对恶性疟原虫COX活性的影响，以电子自旋共振法检测经瑞香素与瑞香素-Fe复合物作用1、2、3和4 h后，恶性疟原虫酪氨酸...