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该发明公开了一种突变型KCNQ1,即S140G-KCNQ1,还公开了利用KCNQ1来筛选心肌KCNQ1钾离子通道的抑制剂的方法,它包括步骤:将(i)表达KCNQ1表达载体和(ii)KCNE1表达载体或KCNE2表达载体转入哺乳动物细胞;在转化的哺乳动物细胞的培养基中,添加候选物质,并测定添加前后的电生理钾离子流,其中,如果加入候选物质后的电生理钾离子流减小,则表明该物质是心肌KCNQ1钾通道的抑制...
目的 研究双苯氟嗪对KCNQ1/KCNE1钾通道电流的影响,以探讨其抗心律失常作用的可能机制。方法 采用双电极电压钳技术,观察双苯氟嗪对表达于非洲爪蟾卵母细胞上的KCNQ1/KCNE1钾通道电流的影响。结果 双苯氟嗪(0.3~30 μmol·L-1)浓度依赖性地抑制KCNQ1/KCNE1电流,IC50为(8.9±1.8)μmol·L-1。在-10~90 mV范围内双苯氟嗪对KCNQ1/KCNE1电...
应用PCR技术对先天性长QT综合征KCNQ1基因进行定点突变的研究PCR Site-Directed Mutagenesis of Long QT Syndrome KCNQ1 Gene in vitro
长QT综合征 KCNQ1 PCR 定点突变
2008/1/20
摘要
利用聚合酶链反应(PCR)技术对长QT综合征(LQTS)KCNQ1基因进行定点突变的研究。首先设计两对引物(包含预定的突变),通过3轮PCR扩增,扩增出含有所需突变位点的片段,然后将片段克隆入T载体中,通过酶切连接的方法将突变点引入到pIRES2-EGFP-KCNQ1中,随后用Effectene转染试剂介导转染HEK293细胞。结果在真核表达载体pIRES2-EGFP-KCNQ1基础上获得...